产品货号:
GS0141
中文名称:
SgTaq PCR Mix(含蓝色染料)
英文名称:
2×SgTaq PCR MasterMix(with Blue Dye)
产品规格:
1mL|5mL|40mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品可用于普通PCR体系的快速建立以及其它PCR相关的实验。2×SgTaq PCR Mix包括MgCl2、dNTP、Taq DNA Polymerase、PCR buffer、loading和PCR增强剂。经过优化的PCR Mix使大多数PCR反应都能很好地进行。PCR反应体系的配制可在几分钟之内完成,只需加入引物、模板DNA和适量的去离子水。
产品中含有溴酚蓝染料,PCR产物可以直接进行电泳。本制品中含有优良的稳定剂,在4℃条件下可以放置3个月。PCR产物具有3′-dA突出端,可轻松克隆至T载体。
组分 | 1mL | 5mL | 40mL |
2×SgTaq PCR Mix(含蓝色染料) | 1mL | 5×1mL | 40×1mL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃
- 模板DNA准备:基因组DNA,反应体系中模板浓度推荐范围1~10ng/μl;质粒或噬菌体DNA浓度0.1~1ng/μl。
- 引物准备:引物浓度推荐范围0.05~1μM。
- 在无菌洁净的PCR管中依次加入以下溶液:
成分 用量 2×SgTaq PCR Mix (含蓝染料) 25μL DNA模板 X μL 上游引物(10μM) 2μL 下游引物(10μM) 2μL Sterilized ddH2O 至50μL - 充分混匀后短暂离心。
- 反应管置于PCR仪中进行反应。
步骤 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 5min 1 变性 94℃ 30sec 35 退火 50~60℃ 30sec 延伸 72℃ 30~60sec/kb 终延伸 72℃ 10min 1 保存 4℃ ∞
问题 | 分析 |
产量低或无PCR产物 | 模板质量差或产量低:模板完整性差;模板纯度差;模板数量少。 |
引物设计不完善。 | |
PCR条件未优化:退火温度;延伸时间及温度;循环数。 | |
反应条件未优化:引物数量不够;Mg2+浓度不够。 | |
模板复杂:高GC含量;长模板。 | |
非特异性PCR产物 | 引物设计不完善。 |
配制反应混合物温度不合适。 | |
反应条件未优化:Mg2+浓度过高;模板用量过多。 | |
PCR条件未优化:退火温度;加DMSO等。 | |
电泳 | 本制品PCR产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。 如有需要,请选择产品SgTaq Plus PCR Mix(货号:GS0144)。 |
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